《分子生物学及基因工程实验教程》介绍了常用的分子生物学和基因工程实验技术。《分子生物学及基因工程实验教程(第四版)》在第三版的基础上,增加了TOPO TA克隆、无缝克隆、发光法检测萤光素酶和烟草瞬时转化等内容,同时修订了部分实验。《分子生物学及基因工程实验教程(第四版)》分为三个部分:**部分为基础性实验,介绍一些简明、*立、可操作性强、实验结果明显、成功率高的实验方案,一般情况下每个实验可在半日内完成,因此特别适用于本科生实验教学;第二部分为综合性实验,实验略微复杂,适用于有一定基础的高年级本科生实验教学;*后一部分为研究性实验,为培养学生*立科研的能力,提供了更加贴近科研工作的实验方案。
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目录
第四版前言
**部分 基础性实验
实验1 质粒的分离——碱裂解法(2)
实验2 Silica法纯化质粒(5)
实验3 吸附膜方法提取质粒DNA(8)
实验4 核酸琼脂糖凝胶电泳及“玻璃奶”法纯化回收DNA片段(11)
实验5 吸附膜方法回收琼脂糖凝胶中DNA片段(14)
实验6 DNA片段的连接(向质粒载体中插入外源DNA)(16)
实验7 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化及转化子的鉴定(蓝白斑筛选法)(18)
实验8 聚合酶链反应(PCR)技术(22)
实验9 聚合酶链反应(PCR)产物克隆——TA克隆(24)
实验10 PCR产物克隆——TOPO TA克隆(26)
实验11 PCR产物克隆——无缝克隆(28)
实验12 菌落PCR方法快速筛选细菌重组子(30)
实验13 重组子的插入方向鉴定(酶切法)(33)
实验14 噬菌体铺板(36)
实验15 M13噬菌体DNA的提取(39)
实验16 SDS法小量提取植物基因组DNA(42)
实验17 CTAB法小量提取植物基因组DNA(45)
实验18 动物组织细胞基因组DNA提取(47)
实验19 血液基因组DNA的纯化分离(49)
实验20 Trizol试剂快速提取植(动)物总RNA(51)
实验21 离心柱型方法纯化植物组织总RNA(53)
实验22 植物启动子表达分析——β葡萄糖醛酸糖苷酶(GUS)组织化学染色(56)
实验23 报告基因表达分析——萤火虫萤光素酶检测(58)
第二部分 综合性实验
实验24 反转录PCR(62)
实验25 谷胱甘肽S转移酶融合蛋白质的表达及纯化(65)
实验26 (His)6标记蛋白质的原核表达和纯化(70)
实验27 蛋白质印迹分析(73)
实验28 化学发光蛋白质印迹分析(78)
实验29 农杆菌介导的烟草叶片瞬时转化(81)
第三部分 研究性实验
实验30 地高辛标记探针的DNA分子杂交(84)
实验31 菌落原位杂交(90)
实验32 转基因植物的PCR检测(92)
实验33 花序浸泡法转化拟南芥及转化子的筛选(95)
实验34 叶盘法转化烟草(99)
实验35 PCR引物的电子设计(102)
主要参考文献(107)